TFIIEによるTFIIHATPアゼとキナーゼ活動の規制は,活性始動複合体形成の過程でTFIIEによって行われる

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝子転写 遺伝子転写
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• TFIIEやTFIIHのような一般的な転写因子 (GTF) は,RNAポリメラーゼIIの転写開始に極めて重要です.
• TFIIEは,TFIIHのキナーゼ活性を刺激し,ヘリカーゼ活性を有することが知られている.

研究 の 目的:

• 人間のTFIIEがヒトTFIIHのDNA依存のATPアゼとキナーゼ活動に与える刺激効果を調査する.
• RNAポリメラーゼIIおよびその他のGTFのリン酸化におけるTFIIEの役割を明らかにする.

主な方法:

• DNAに依存したATPase活性を測定するための生化学的測定法.
• キナーゼアッセイは,RNAポリメラーゼIIとGTFのリン酸化を評価する.
• プレイニシアチブ・コンプレックス・アセンブリの分析.

主要な成果:

• 人間のTFIIHはDNAに依存するATP酵素活性を示しています.
• TFIIEは,TFIIHのATPアゼとキナーゼの両方の活動を有意に刺激する.
• RNAポリメラーゼIIのTFIIE依存型リン酸化は,DNAの存在に関係なく発生するが,DNAに結合した先行始動複合体では遅れている.
• TFIIHはTFIIID tau (TBP),TFIIE-alpha,およびTFIIF-alpha (RAP74) をリン酸化する.

結論:

• TFIIEは,トランスクリプションの開始時に,TFIIHの機能に重要な規制的役割を果たします.
• TFIIEはRNAポリメラーゼIIのリン酸化ダイナミクスと,他の重要な転写因子のリン酸化に影響を与える.