マウスの骨髄腫細胞の体細胞ハイブリダイゼーション

科学分野:

• 免疫学 免疫学とは
• 細胞生物学 細胞生物学
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• ソマティック細胞のハイブリッド化技術により,ハイブリッド細胞系が生成されます.
• マウスミエロマの細胞系は,ハイブリドトーマを生成するために利用されています.
• ハイブリッド細胞における免疫グロブリン鎖発現には,特徴づけが必要である.

研究 の 目的:

• 異なるマウス骨髄腫細胞系間の体細胞ハイブリッドを隔離し,特徴づけること.
• これらのハイブリッドにおける免疫グロブリン重鎖 (H) と軽鎖 (L) の発現を分析する.
• 免疫グロブリン発現の安定性を評価し,潜在的な遺伝的不安定性を特定する.

主な方法:

• 改変技術を用いた体細胞ハイブリッドの隔離.
• HATまたはHAT-ouabainの選択手順によるハイブリッド細胞の選択.
• 染色体数分析とH-2表面抗原発現によるハイブリッド性の確認.

主要な成果:

• 3つのハイブリッド細胞系 (IgG2B, κ X IgG2a, κ; IgG1, κ X IgG2b, κ; IgG1, κ X IgM, λ) が成功裏に生成されました.
• ハイブリッド細胞は,新しい鎖の形成なしに,HとL鎖の両方の親型を表現した.
• ハイブリッド分子において,親鎖のHおよび/またはL鎖の二酸化硫化物結合混合物が見られた.
• 13ヶ月まで安定した状態で,頻繁に分離するクローンが現れ,親鎖合成を失いました.

結論:

• マウスの骨髄腫細胞系から派生した体細胞ハイブリッドは,親の免疫グロブリン鎖の発現を維持する.
• ハイブリッド細胞は,HとL鎖の二硫化結合混合物により分子異質性を示す.
• 初期安定性にもかかわらず,免疫グロブリン連鎖発現の喪失につながる遺伝的不安定性は,サブクローンで頻繁に発生します.