関連する実験動画
サイクロスポリン感受性T細胞転写因子NFATppの分離
P G McCaffrey1, C Luo, T K Kerppola
1Division of Tumor Virology, Dana-Farber Cancer Institute, Boston, MA.
Science (New York, N.Y.)
|October 29, 1993
まとめ
研究者らは,T細胞から活性化T細胞の核因子p (NFATp) を浄化し,そのDNAをクローンした. この転写因子は,インタールイキン-2 (IL-2) 遺伝子発現を調節することによって,免疫反応を開始するために重要である.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- トランスクリプション・ファクター研究
背景:
- 活性化されたT細胞の核因子 (NFAT) は,T細胞におけるインタールイキン-2 (IL-2) の発現を調節する.
- NFATpは,フォスフォタンパク質であり,DNA結合特異性を決定し,サイクロスポリンAやFK506.6のような免疫抑制剤によって標的にされます.
研究 の 目的:
- ネズミのT細胞からNFATpを浄化する.
- NFATp.をコードする補完的なDNA (cDNA) クローンを分離する.
- T細胞転写におけるNFATpの機能を分析する.
主な方法:
- ネズミのT細胞からNFATpの浄化.
- NFATpをコードするcDNAの分離.
- 断片化されたNFATpが,細菌における再結合タンパク質として発現する.
- DNA結合特異性を評価するために,電泳運動シフトアッセイ (EMSAs) を行う.
主要な成果:
- NFATpは,ネズミのT細胞から成功裏に浄化されました.
- NFATpをコードするcDNAクローンが分離されました.
- リコンビナントの切断されたNFATpは,ネズミのIL-2プロモーターのNFAT部位に特異的に結合する.
- 再結合されたNFATpは,転写的に活性な複合体を形成した.
結論:
- NFATpの分子クローンにより,この重要なT細胞転写因子の詳細な分析が可能になりました.
- NFATpは,免疫応答の開始に中心的な役割を果たします.
- NFATpの機能を理解することは,T細胞の活性化と調節に不可欠です.