フェーグ・ラムダ・cIタンパク質の転写活性化機能の標的である

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 微生物学 微生物学とは
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• ファグ・ラムダのcIタンパク質は,PRMプロモーターの転写開始を活性化することが知られている.
• この活性化には,cIとRNAポリメラーゼの直接接触が伴うと考えられています.
• cIのDNA結合領域の2つの負の電荷の残基は,この活性化に不可欠であり,RNAポリメラーゼと相互作用することを暗示しています.

研究 の 目的:

• 転写活性化中にファグラムダCIタンパク質と相互作用するRNAポリメラーゼの特定のサブユニットを特定する.
• cIとRNAポリメラーゼの相互作用の分子基礎を調査する.

主な方法:

• 変異したCIタンパク質の機能を回復できるRNAポリメラーゼ変異体を選択することで遺伝的アプローチを利用した.
• cIとRNAポリメラーゼの両方の特定のアミノ酸置換を分析し,相互作用部位を特定しました.

主要な成果:

• この研究では,RNAポリメラーゼのシグマサブユニットをCIタンパク質の相互作用パートナーとして特定し,アルファサブユニットの関与に関する以前の示唆に反した.
• cIタンパク質 (アスパラギン酸からアスパラギン) の特定の変異は,そのカルボキシル末端の近くのシグマサブユニット (アルギニンからヒスティジン) の変異によって抑制されました.
• この抑制は,cIの負の電荷を持つ活性化領域と,シグマのカルボキシル末端にある正の電荷を持つ残基の群れとの間の直接的な物理的相互作用を示しています.

結論:

• ファグのラムダcIタンパク質は,RNAポリメラーゼのシグマサブユニットと直接相互作用して,転写開始を活性化します.
• シグマサブユニットのカルボキシル末端は,CIの活性化領域の結合部位として機能する.
• この発見は,細菌のタンパク質とRNAポリメラーゼの相互作用による転写調節に関する私たちの理解を洗練します.