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TFIIIBコンポーネントのリン酸化によって媒介されたRNAポリメラーゼIII転写のミトス抑制 in vitro

J M Gottesfeld¹, V J Wolf, T Dang

¹Department of Molecular Biology, Scripps Research Institute, La Jolla, CA 92037.

Science (New York, N.Y.)

|January 7, 1994

まとめ

サイクリンBによって活性化されるミトティックタンパク質キナーゼは,Xenopusの卵エキスにおけるRNAポリメラーゼIIIの転写を抑制する. この抑制は,TFIIIB転写開始因子の直接的リン酸化によって起こります.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
細胞サイクル規制について
遺伝子転写遺伝子転写

背景:

Xenopus laevisの卵エキスは,インターフェーズ中のRNAポリメラーゼIII (Pol III) の転写をサポートする.
細胞サイクルの移行には,転写に影響を与える規制キナーゼが含まれます.

研究の目的:

ミトキナーゼがPol III転写を抑制するメカニズムを調査する.
ミトス抑制による標的となるPol III転写機構の特定の成分を特定する.

主な方法:

転写アッセイのための利用されたXenopus laevisインターフェーズサイトゾール抽出物.
ミトキナーゼを活性化するために再結合B1サイクリンを使用.
簡略化された転写システムで,親和性浄化されたp34cdc2-サイクリンBキナーゼ (ミトーシス促進因子) を使用した.
in vitroアッセイを用いて転写因子のリン酸化状態を調査した.

主要な成果:

B1サイクリンを添加すると,ミトキナーゼが活性化され,Pol IIIの転写が抑制される.
ミトーシス促進因子 (p34cdc2-サイクリンBキナーゼ) は,この抑制を引き起こすのに十分でした.
ミトス抑制は,TFIIIB開始因子内のコンポーネントのリン酸化を直接含むが,これはTATAボックス結合タンパク質 (TBP) を含む.
TFIIIB-TBP分子の転写活性は,ミトキナーゼリン酸化とアルカリリンファタゼ脱リン酸化によって調節された.

結論:

ミトキナーゼ,特にp34cdc2-サイクリンBは,RNAポリメラーゼIIIの転写を抑制する直接的な役割を果たします.
ミトキナーゼによるTFIIIBのリン酸化は,細胞サイクル中のPol III転写を調節する重要なメカニズムです.
TFIIIBは,Pol III転写の細胞サイクル依存の調節のための直接的な標的である.

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