リポソーム媒介の遺伝子転送は,人間の血管の滑らかな筋肉細胞に発生する
J G Pickering1, J Jekanowski, L Weir
1Department of Medicine (Cardiology), St Elizabeth's Hospital, Tufts University School of Medicine, Boston, Mass. 02135.
Circulation
|January 1, 1994
まとめ
人間の血管の滑らかな筋肉細胞におけるリポソーム媒介遺伝子転送 (リポフェクション) は非効率である. しかし,遺伝子の発現は,レステノティック組織からの細胞ではより高く,細胞特性がトランスフェクションの成功に影響することを示唆しています.
科学分野:
- 心血管生物学 心血管生物学
- 遺伝子療法の遺伝子治療法
- 細胞生物学 細胞生物学
背景:
- 異種DNAを配送するためにカチオンのリポソームを使用するリポフェクションは,重要な遺伝子治療技術です.
- 異なる細胞タイプにおけるリポフェクションの効率を理解することは,その臨床応用にとって極めて重要です.
- 人間の血管滑らかな筋肉細胞 (hVSMCs) は,以前,リポフェクションについて研究されていませんでした.
研究 の 目的:
- プライマリヒト血管の滑らかな筋肉細胞におけるリポフェクションの効率を調査する.
- 正常な組織,動脈硬化組織,およびレステノス組織から派生したhVSMCにおける感染率を比較する.
- hVSMCにおける遺伝子移植の成功に影響を与える要因を特定する.
主な方法:
- ルシフェラーゼまたはベータ-ガラクトシダゼをコードするプラズミドを使用してhVSMCの最適化リポフェクション.
- NIH 3T3とウサギのVSMCとのトランスフェクション効率の比較.
- 人体の様々な血管源の細胞におけるレポーター遺伝子発現の分析.
- 感染した細胞におけるミトーシス指数および共発現の評価.
主要な成果:
- 患者からのhVSMC培養15種とも,陽性なレポーター遺伝子発現を示した.
- hVSMCの遺伝子発現は,NIH 3T3細胞と比較して (123倍はルシフェラーゼ,30倍はベータ-ガラクトシダゼ) は著しく低かった.
- ルシフェラーゼ発現は,主動性動脈硬化性プラーク (P < .03) よりも,レステノス性病変の細胞で有意に高かった.
- 再結合遺伝子を発現する細胞は,より高いミトーシス指数 (P < .05) を示した.
- 同感染は,複数の遺伝子 (23-36%の共同発現) の効率的な共配を示した.
結論:
- hVSMCにおける脂質伝染効率は,in vitroでは低い.
- リステノティック組織から派生したhVSMCでは,トランスフェクションが強化されています.
- 成長率などの細胞特性は,ヒトの血管細胞におけるリポソーム媒介遺伝子移植の成功に不可欠である.
- 人間の血管細胞における遺伝子転送効率を改善するためにさらなる研究が必要である.
