U1-70Kタンパク質のチオフォスフォリレーションは,mRNA前スプライシングを阻害する

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• RNA 処理 RNA 処理
• 遺伝子発現の表現について

背景:

• U1小核リボ核タンパク質 (snRNP) は,プレ-mRNAスプライシングに不可欠です.
• U1 70K タンパク質は,U1 snRNP.内の唯一の高度にリン酸化されたタンパク質です.
• 70Kタンパク質のリン酸化は,関連するキナーゼ活性によって媒介されます.

研究 の 目的:

• プレ-mRNAスプライシングにおけるU1 70Kタンパク質リン酸化の役割を調査する.
• 70Kタンパク質のリン酸化状態がスプライソームの組立と機能に影響するかどうかを判断する.

主な方法:

• ATPまたはATP-ガンマ S.を使用したU1 snRNPのインビトロリン酸化.
• U1 snRNPを欠けているHeLa核スプライシングエキスを,改造されたU1 snRNPで補完する.
• スプライソーム形成とスプライシング活動の評価.

主要な成果:

• 通常リン酸化70Kタンパク質を持つU1snRNPは,スプライシング活動を回復させた.
• チオフォスホル化U1snRNP (脱フォスホル化に耐性) がスプライシングを阻害した.
• スプライソーム形成は70Kタンパク質のリン酸化状態の影響を受けませんでした.

結論:

• U1特異の70Kタンパク質のリン酸化状態は,mRNA前スプライシングにおいて極めて重要です.
• スプライシング反応における前触媒的ステップには,リン酸化が必要である.
• この修正は,スプライシングプロセスにおける規制的な役割を果たします.