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エンドプラズマ網膜から芽生えた膀のGTPアゼ活性化タンパク質の要求

T Yoshihisa¹, C Barlowe, R Schekman

¹Howard Hughes Medical Institute, Department of Molecular and Cell Biology, University of California, Berkeley 94720.

Science (New York, N.Y.)

|March 5, 1993

まとめ

Sec23pタンパク質は,Sar1p GTPase活性を活性化することによって,エンドプラズマ網膜の膀形成に不可欠です. この研究は,Sec23pを細胞輸送に不可欠な新しいGTPase活性化タンパク質として特定しています.

科学分野:

細胞生物学細胞生物学
分子生物学は分子生物学である.
バイオケミストリーバイオケミストリー

背景:

エンドプラズマ網膜 (ER) からの膀形成は,細胞の重要なプロセスです.
このプロセスは,小さなGTP結合タンパク質Sar1pと,他のタンパク質との相互作用を必要とする.
Sar1pの規制メカニズムを理解することは,膀輸送の解読の鍵です.

研究の目的:

Sar1pの調節におけるSec23pの役割を調査する.
Sec23pがSar1pのGTPase活性化タンパク質 (GAP) として機能するかどうかを判断する.
膀芽の文脈でSar1pとSec23pの相互作用を特徴づけるために.

主な方法:

Sar1p.p.のGTPase活性を測定する生化学的測定法.
タンパク質の機能を抑制する抗体の使用と相互作用の研究.
熱可変性Sec23p.を持つ変異株の分析
既知のタンパク質ファミリーを特定するためのシーケンスホモロジー分析.

主要な成果:

Sec23pは,孤立したサブユニットとしても,オリゴメア複合体内でも,Sar1p GTPaseの活性 (10〜15倍) を著しく刺激します.
この活性化はSar1pに特異的であり,Ypt1pやARFのような他の小さなGTP結合タンパク質には影響しません.
抗体阻害の研究は,他のサブユニットとは独立して,Sec23pの活性化における直接的な役割を確認しています.
変異したsec23菌株は熱可動性活性化を示し,特定の条件下でSec23pの機能的不安定性を示しています.

結論:

Sec23pは,ER小胞の形成の重要な調節体であるSar1pのための新しいGTPase活性化タンパク質 (GAP) として作用します.
Sar1pとSec23pの相互作用は,膀芽の開始に不可欠である.
Sec23pは,そのシーケンスが既知のGAPと類似性を欠いているため,新しいクラスであるGAPを表します.

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