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ヒト由来酵母人工染色体の生殖線伝達と発現

A Jakobovits¹, A L Moore, L L Green

¹Cell Genesys Inc., Foster City, California 94404.

|March 18, 1993

まとめ

この研究は,酵母人工染色体 (YACs) を使用したマウスの胚性幹細胞に大きなヒトDNA断片の生殖線伝播を実証しています. 改造された細胞は,マウスの生殖線を成功裏に再開し,大規模な遺伝子機能の研究を可能にしました.

科学分野:

遺伝学遺伝学とは
ゲノミクスゲノミクスとは
分子生物学は分子生物学である.

背景:

大量のDNA断片でマウスのゲノムを操作することは,遺伝子の機能と発現を研究するために重要です.
酵母人工染色体 (YACs) は,大型DNA分子をクローン化および操作するための安定した方法を提供します.

研究の目的:

酵母細胞融合を用いて,大きなヒトDNA断片をマウスの胚性幹細胞 (ES) に移植する可能性を実証する.
マウスにおけるこれらの大きなDNA断片の生殖線伝播および発現の可能性を評価する.
酵母DNAとYACの共同統合に関する懸念に対処するために.

主な方法:

ヒトのYACsを含む酵母球質のマウスES細胞との融合.
改造されたES細胞の選択と特徴付け.
改造されたES細胞からキメリックマウスの生成.
細菌系伝播と遺伝子発現の評価.

主要な成果:

マウスのES細胞に,酵母球体プラスト融合による大きなヒトDNA断片の導入と生殖線伝播を成功させた.
酵母DNAの共同統合にもかかわらず,これらの改変されたES細胞から派生したマウスの適切な発達の実証.
移植されたヒトDNA断片の発現の証拠は,細菌系にある.

結論:

酵母細胞融合は,YACを含む大きなDNA断片をマウスのES細胞に転送するための効果的な方法です.
ヒトの大型DNA断片の生殖線伝達と発現は達成可能であり,マウスでの高度なゲノム研究への道を開く.
酵母DNAの共同統合は,改変されたES細胞の発達の可能性や生殖系伝播能力を必ずしも損なわない.

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