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カット・アンド・ペーストから複製型Tn7トランスポーゼーションに切り替える

E W May1, N L Craig

  • 1Howard Hughes Medical Institute, Johns Hopkins University School of Medicine, Baltimore, MD 21205 USA.

Science (New York, N.Y.)
|April 19, 1996
PubMed
まとめ

バクテリアのトランポゾンTn7の1つの突然変異は,そのトランポジションメカニズムをカット&ペーストから複製性へと変化させます. このスイッチは,5'端処理をブロックした結果,Tn7の適応性のあるDNA修復と複製戦略を明らかにした.

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科学分野:

  • * 分子生物学 * 分子生物学
  • * 遺伝学について
  • * 微生物学について

背景:

  • * 細菌のトランスポゾンTn7は,通常,トランポジションのためにカット&ペーストメカニズムを使用します.
  • * このプロセスは,ドナーのDNA部位からトランポゾンを取り除き,ターゲット部位に挿入し,単純な挿入を形成します.

研究 の 目的:

  • * Tn7の転置がカット&ペーストモードから複製モードに切り替えられるメカニズムを調査する.
  • * この機械的なスイッチにつながる特定の分子イベントを特定する.

主な方法:

  • * 研究されたTn7トランスポーゼーション in vitroおよびin vivo.
  • *トランポジションに不可欠なTn7でコードされたタンパク質に特定のアミノ酸変異を導入した.
  • *トランポゾン末端の処理と,その結果生じるDNA製品を分析した.

主要な成果:

  • * 重要なTn7タンパク質の単一のアミノ酸変異は,5'鎖の分裂を阻害したが,3'鎖の処理は阻害しなかった.
  • *この選択的封鎖は,シャピロの中間物質の形成をもたらし,複製的転置につながった.
  • *この研究は,プラズミド融合の生成を in vitro で実証し,同統合製品の生成を in vivo で実証した.

結論:

  • *結果は,5' と 3' 端処理反応の分離がTn7.7の転置経路を決定することを明らかにした.
  • * Tn7は,宿主DNA修復および複製機械をカット&ペーストおよび複製トランポジションの両方のために利用する際の顕著な可塑性を示しています.