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哺乳類DNAトポイソメラーゼIによるSRタンパク質の固有リン酸化

F Rossi¹, E Labourier, T Forné

¹Institut de Génétique Moléculaire, Université de Montpellier II, France.

|May 2, 1996

まとめ

DNAトポイソメラーゼIはSRタンパク質の特定のキナーゼとして作用し,RNAスプライシングに不可欠です. DNAトポイソメラーゼIの阻害剤は,SRタンパク質のリン酸化にも影響を及ぼし,その役割を vivo で示唆しています.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
バイオケミストリーバイオケミストリー
遺伝学遺伝学とは

背景:

メタゾアンのスプライシングファクターは,リボヌクレオプロテイン (RNP) のコンセンサス配列と,スプライシングに不可欠なアルギニン-セリン (RS) ドメインを有しています.
主要なスプライシング因子には,SRタンパク質 (例えば,SC35,SF2/ASF),U1小核リボ核タンパク質 (snRNP) タンパク質 (U1-70K),U2snRNP補助因子 (U2AF) が含まれる.
SRタンパク質とU1-70Kは,体内でリン酸化され,そのスプライシング活動に影響を与えます.

研究の目的:

SRタンパク質のリン酸化を司る特定のタンパク質キナーゼを特定する.
接合因子のリン酸化におけるDNAトポイソメラーゼIの役割を調査する.

主な方法:

SRタンパク質に特異的なタンパク質キナーゼの浄化.
ATP結合親和性およびキナーゼ活性を決定する生化学的測定法.
キャンプトテシンおよびその誘導体を用いた抑制試験は,DNAの存在下で実施された.

主要な成果:

SRタンパク質に特異的なタンパク質キナーゼが精製され,DNAトポイソメラーゼIとして特定されました.
DNAトポイソメラーゼIは,正規のATP結合モチーフがないにもかかわらず,50 nMの解離定数でATPを結合する.
既知のDNAトポイソメラーゼI阻害剤であるカンプトセチンは,キナーゼ活性を著しく抑制し,DNAに依存した方法でSRタンパク質のリン酸化を変化させた.

結論:

DNAトポイソメラーゼIはSRタンパク質に対する特定のキナーゼ活性を持っています.
この発見は,DNAトポイソメラーゼIが,RNSのスプレイスングの調節に関与する可能性が高いSRタンパク質キナーゼであることを示唆しています.
これは,DNAトポイソメラーゼIのDNAトポイソメラーゼIのDNAトポロジー管理における正規の役割を超えた新しい機能を特定しています.

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