末端微分化したヒト表皮ケラチノ細胞の角状の封筒は,交互に結合したタンパク質で構成されています

科学分野:

• 皮膚科 皮膚科について
• バイオケミストリー バイオケミストリー
• 細胞生物学 細胞生物学

背景:

• 角層は,表皮の最も外側の層であり,溶解に抵抗するタンパク質を含んでいます.
• これらの不溶性タンパク質は,プラズマ膜の下にある構造である角状封筒の不可欠な構成要素です.
• 角状の封筒の構造を理解することは,皮膚のバリア機能を理解するために不可欠です.

研究 の 目的:

• ヒトの表皮カールスの不溶性タンパク質分子の性質を調査する.
• 角状の封筒内のタンパク質のクロスリンクを特徴付けるために.
• in vitroで微分化されたケラチノサイトが,in vivoで見られるクロスリンクを模倣するかどうかを判断する.

主な方法:

• 溶解分析は,硫酸ナトリウムドデシルと還元剤を用いて行われます.
• 角状の封筒のプロテオリスティックな消化を行い,その後クロマトグラフィック分析を行う.
• 培養ヒト表皮ケラチノ細胞における角化封筒タンパク質の合成とラベル付け.
• 放射性ライシンを用いたエプシロン・ガンマ・グルタミル・ライシンクロスリンクの定量化.

主要な成果:

• ストラトム・コーニウムタンパク質のわずかな分子は,厳しい環境下では溶けません.
• タンパク質分解による消化により,リジン残基の約18%が,エプシロン-ガンマ-グルタミル) リジンクロスリンクの一部であることが明らかになった.
• In vitroで合成され分化されたケラチノサイト包膜は,同様のクロスリンク拡張性を示した.
• 角状の封筒は,洗浄剤/還元剤では不溶性を示したが,プロテアゼ処理後に溶解性を示した.

結論:

• 角状の封筒の不溶性および溶解性特性は,交互にリンクされたタンパク質の格子構造によって説明されます.
• エプシロン・ガマ・グルタミル・ライシン (Epsilon-gamma-glutamyl) は,ヒトの表皮の角化膜に含まれる主要な交絡性ダイペプチドである.
• 培養されたヒトケラチノサイトは,角状封筒のクロスリンクを研究するための有効なモデルを提供します.