トランスクリプトは,RNAポリメラーゼのプロセシビティと延長率を増加させる
R A King1, S Banik-Maiti, D J Jin
1Laboratory of Molecular Genetics, National Institute of Child Health and Human Development, National Institute of Health, Bethesda, Maryland 20892, USA.
HK022ファージは,抗終結部位 (プット部位) で特定のRNA構造を用いて,遺伝子発現を制御する. このプロセスは,余分なタンパク質を必要とせずに転写の読み込みと延長を強化し,RNA自体がポリメラーゼの活動を調節することを示唆しています.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- ウイルス学 ウイルス学 ウイルス学
- 遺伝子規制 遺伝子規制
背景:
- ラムドイドファグHK022は,トランスクリプション終止信号を克服するために,シス作用のアンチターミネーションサイト (プットサイト) を利用します.
- アンチターミネーションはファグの遺伝子発現に不可欠ですが,しばしば複雑なタンパク質機構が含まれます.
- HK022アンチターミネーションの正確なメカニズムとそのRNA構造への依存は完全に解明されていません.
研究 の 目的:
- フェーグHK022のプット部位によって媒介されるアンチターミネーションのメカニズムを調査する.
- この過程におけるRNA構成と細胞タンパク質の役割を決定する.
- プットサイトがRNAポリメラーゼの延長と一時停止に与える影響を特徴付けるために.
主な方法:
- 予測されたRNA幹形成に影響を与えるプット変異の分析と,その抗終結への影響.
- 浄化されたRNAポリメラーゼ,テンプレートDNA,および基板を用いたインビトロ転写アッセイ.
- RNAポリメラーゼβ'サブユニットのサイト指向型変異を,抗終末化におけるその役割を評価する.
主要な成果:
- アンチターミネーション活動は,プットトランスクリプト内の特定のRNA幹構造の形成に厳密に依存しています.
- 浄化されたシステムでは,ターミネーターのプット依存の読み込みと伸び率の増加が観察され,追加のタンパク質の必要がないことを示しました.
- ベータ'サブユニットの亜鉛指領域における突然変異は,転写に対するプット媒介効果を廃止した.
結論:
- HK022アンチターミネーションは,補助タンパク質を必要としない単純なRNAベースのメカニズムです.
- プットトランスクリプトの構成は,読み込みと停止の抑制を含むRNAポリメラーゼの延長特性を直接調節します.
- このRNA中心のメカニズムは,他の既知のアンチターミネーション経路に対して明確な代替案を提供します.
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