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Srcチロシンキナーゼと,SH3ドメインによって媒介されるヒトのカリウムチャネルとの結合

T C Holmes¹, D A Fadool, R Ren

¹Department of Biochemistry and Volen Center for Complex Systems, Brandeis University, Waltham, MA 02254, USA.

Science (New York, N.Y.)

|December 20, 1996

まとめ

人間のKv1.5カリウムチャネルは,プロリンに富んだモチーフを介してSrcチロシンキナーゼと相互作用する. この結合は,チャネルリン酸化と抑制された電流につながり,新しいシグナリング複合体を明らかにします.

科学分野:

バイオケミストリーバイオケミストリー
分子生物学は分子生物学である.
心血管生理学心血管の生理学

背景:

人間のKv1.5カリウムチャンネル (hKv1.5) は,心臓の電気活動に不可欠です.
プロリンに富んだ配列は,Srcホモロジー3 (SH3) ドメインの結合モチーフとして知られています.
Srcチロシンキナーゼは,細胞のシグナル伝達と増殖に役割を果たします.

研究の目的:

hKv1.5とSrcチロシンキナーゼの間の直接的な相互作用を調査する.
この相互作用がhKv1.5チャネル活動に及ぼす機能的影響を決定する.

主な方法:

タンパク質とタンパク質の相互作用を検出するための共免疫プレシピテーション.
サイト・ディレクテッド・ミュータジェネシス (SITE-DIRECTED MUTAGENESIS) により,重要な結合ドメインを特定する.
電気生理学的記録 (例えば,パッチクランプ) で,チャネル機能を測定する.
ティロシンリン酸化を評価するためのウェスタン・ブロッティング.

主要な成果:

クローンとネイティブのhKv1.5とSrcチロシンキナーゼの間の直接的な関連が確認されました.
この相互作用は,hKv1.5におけるプロリンに富んだモチーフと,Src.のSH3ドメインによって媒介される.
v-Srcとの共発は,hKv1.5のチロシンリン酸化とチャネル電流の抑制をもたらした.

結論:

hKv1.5とSrcチロシンキナーゼを含むシグナル伝達複合体の直接生化学的証拠を確立しました.
タイロシンリン酸化によるカリウムチャネル機能の新たな規制メカニズムを特定した.
心臓の生理学と疾患におけるhKv1.5のSrc媒介調節の潜在的な役割を示唆しています.

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