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ミトーシスおよびG2チェックポイントの制御:セリン-21616でCdc25Cをリン酸化することによって14-3-3タンパク質結合の調節

C Y Peng¹, P R Graves, R S Thoma

¹Department of Cell Biology and Physiology, Washington University School of Medicine, 660 South Euclid Avenue, St. Louis, MO 63110, USA.

Science (New York, N.Y.)

|September 5, 1997

まとめ

ヒトCdc25Cタンパク質のセルリン-216でのリン酸化と14-3-3タンパク質への結合は,その活動を否定的に調節する. これは,Cdc25Cをヒト細胞のチェックポイント制御における重要な標的として特定しています.

科学分野:

細胞生物学細胞生物学
分子生物学は分子生物学である.
バイオケミストリーバイオケミストリー

背景:

人間のCdc25Cは二重特異性のタンパク質フォスファターゼで,ミトスの侵入に不可欠です.
Cdc25Cはタンパク質キナーゼCdc2を脱酸化させ,細胞サイクル進行を調節する.
インターフェーズでは,Cdc25Cはセリン-216でリン酸化され,14-3-3タンパク質と結合します.

研究の目的:

Cdc25C調節におけるセリン-216のリン酸化と14-3-3結合の役割を調査する.
Cdc25CがDNA損傷のチェックポイント経路の標的であるかどうかを判断する.

主な方法:

セルリン-216のリン酸化を防ぐために,サイト指向型変異.
野生型および変異種Cdc25C.の条件付き過剰発現
ミトスのタイミングとG2チェックポイントの整合性を評価する.
Chk1キナーゼを用いたインビトロリン酸化アッセイ.

主要な成果:

セリン-216のリン酸化を阻害する突然変異が14-3-3結合を廃止した.
非リン酸化可能な突然変異体の過剰発現はミトスのタイミングを乱した.
変異体を発現する細胞は,DNA損傷または複製ストレスによって誘発されたG2チェックポイントの停止を逃れた.
ヒトChk1キナーゼがセルリン-216にCdc25Cをリン酸化した in vitro.

結論:

セリン-216のリン酸化と,その後の14-3-3結合は,ヒトのCdc25C活動を否定的に調節する.
Cdc25Cは,ヒト細胞のチェックポイント制御機構の重要な標的である.
この規則は,細胞サイクル中にゲノムの完全性を維持するために不可欠です.

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