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Ste5 RING-H2ドメイン:酵母フェロモンシグナル伝達のためのSte4-促進オリゴメリゼーションにおける役割
C Inouye1, N Dhillon, J Thorner
1Department of Molecular and Cell Biology, Division of Biochemistry and Molecular Biology, University of California, Berkeley, CA 94720-3202, USA.
Science (New York, N.Y.)
|October 6, 1997
まとめ
Ste5 RING-H2ドメインは,酵母菌の交配に不可欠です. それはSte4との相互作用を媒介し,Ste5の自己結合とフェロモン応答のためのミトゲン活性化タンパク質キナーゼ (MAPK) カスケードの活性化を可能にします.
科学分野:
- 細胞の信号伝達経路は,
- 分子生物学は分子生物学である.
- イースト遺伝学 イースト遺伝学
背景:
- Ste5は,酵母フェロモン反応のMAPKカスケードにおける脚架タンパク質として作用する.
- Ste5はSte4と相互作用し,潜在的に受容体の活性化とMAPKのカスケード刺激を結びつける可能性があります.
研究 の 目的:
- 相互作用とシグナリングを媒介するSte5 RING-H2モチーフの役割を調査する.
- Ste5機能とオリゴメリゼーションのためのSte4-Ste5相互作用の必要性を決定する.
主な方法:
- Ste5 RING-H2モチーフ (C177S,C177A,C180A) のサイト指向型変異.
- タンパク質の相互作用を評価するためのインビトロ結合測定法.
- ste5Deltaとste4Deltaとste5Deltaの変異体の機能的救済を評価するための酵母交配アッセイ.
主要な成果:
- 機能的なRING-H2モチーフ (Ste5(C177A C180A)) を欠いた突然変異体は,ste5Deltaの交配欠陥を救うことに失敗した.
- Ste5 ((C177A C180A) はMAPK成分に結合したが,Ste4は結合せず,オリゴメリ化しなかった.
- Ste5を二分化ドメインに融合させることで,ste5Deltaとste4Deltaとste5Deltaの細胞の交配が回復しました.
結論:
- Ste5 RING-H2ドメインは,Ste4-Ste5の相互作用に不可欠である.
- Ste4-Ste5の相互作用は,Ste5の自己結合とMAPKのカスケードシグナル伝達の前提条件である.
- RING-H2ドメインは,酵母フェロモンの反応におけるステップ5のエスカフォルド機能に不可欠です.