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G1 CdkによるSic1pのリン酸化は,その分解とS相への入り口に必要なものです
R Verma1, R S Annan, M J Huddleston
1Division of Biology, Box 156-29, California Institute of Technology, Pasadena, CA 91125, USA.
Science (New York, N.Y.)
|October 23, 1997
まとめ
芽生えた酵母細胞サイクル進行は,G1サイクリン依存キナーゼ (Cdk) に依存し,Sic1pの分解を誘発する. G1 CdkによるSic1pのリン酸化により,Sic1pのユビキチン化と破壊を標的とし,G1/S相移行を可能にします.
科学分野:
- 細胞生物学 細胞生物学
- 分子生物学は分子生物学である.
- バイオケミストリー バイオケミストリー
背景:
- 発芽酵母におけるG1段階からS段階への移行は,細胞サイクル進行において極めて重要です.
- S相サイクリン依存キナーゼ (Cdk) 阻害体Sic1pの分解は,G1 Cdksによって調節される重要なイベントです.
研究 の 目的:
- Sic1pにおけるG1 Cdkリン酸化部位の役割を調査する.
- Sic1pが分解を狙うメカニズムを解明する.
- G1/S移行におけるリン酸化とタンパク質分解の貢献を理解する.
主な方法:
- 多次元電気スプレー質量スペクトロメトリを使用して,Sic1pのG1 Cdkリン酸化部位を in vitroおよびin vivoでマッピングしました.
- 重要なリン酸化部位が欠けているSic1p変異体が分析されました.
- ユビキチネーションアッセイは,浄化されたフォスフォSic1pとサイクリン欠乏したG1抽出物を用いて実施した.
主要な成果:
- 3つのCdkリン酸化部位を欠いたSic1p変異体は,Cdc34p依存型ユビキチネーションに耐性を示した.
- この変異したタンパク質は,in vivoでは安定しており,DNA複製を止めました.
- 浄化されたフォスフォSic1pは,サイクリンが欠乏したG1抽出物の中にユビキチン化され,G1サイクリンの役割を強調した.
結論:
- Sic1pのG1 Cdkリン酸化は,そのユビキチン化およびその後の分解に不可欠である.
- G1サイクリンは,Sic1pを標的として破壊する上で重要な役割を果たします.
- リン酸化とタンパク質分解が協力して芽生えた酵母におけるG1/S相移行を調節する分子モデルが提案されています.