タンパク質キナーゼPDK1を通じてフォスホイノシチド3キナーゼによって制御されるタンパク質キナーゼCイソタイプ
J A Le Good1, W H Ziegler, D B Parekh
1Protein Phosphorylation Laboratory, Imperial Cancer Research Fund, 44 Lincoln's Inn Fields, London WC2A 3PX, UK.
タンパク質キナーゼB (PKB) キナーゼPDK1はPKC同型,特にPKCzetaとPKCdeltaをリン酸化する. このリン酸化は,フォスホイノシチド3キナーゼ (PI3キナーゼ) に依存した方法で発生し,PKCシグナル伝達経路におけるPDK1の重要な調節作用を示唆する.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- 細胞シグナル伝達 細胞信号伝達
- バイオケミストリー バイオケミストリー
背景:
- 保存されたリン酸化部位は,タンパク質キナーゼA (PKA),PKG,PKCキナーゼサブファミリーに存在する.
- タンパク質キナーゼB (PKB) キナーゼ,PDK1は,PKC同型をリン酸化する潜在的な候補である.
研究 の 目的:
- PDK1がPKC同型をリン酸化するかどうかを調査する.
- PDK1媒介PKCリン酸化のメカニズムと調節を解明する.
主な方法:
- 純化されたPDK1およびPKC同型を用いたインビトロキナーゼアッセイ.
- 人間の胚性腎臓 (293) 細胞におけるイン・ビボ試験で,リン酸化を評価する.
- タンパク質複合体の形成を検出するための共免疫プレシピテーション.
- フォスホイノシチド3キナーゼ (PI3キナーゼ) 依存性の分析.
主要な成果:
- PDK1はPKCzetaとPKCdeltaの活性化ループ部位を直接リン酸化した.
- PDK1に依存したリン酸化は,PI3キナーゼに依存した方法でin vivoで発生しました.
- テストされたPKCファミリーのすべてのメンバーは,PDK1.1との複合体を形成しました.
- PKCdeltaのPDK1-依存型リン酸化は,PKCとPDK1活性化剤の組み合わせによって強化された.
- PKCdeltaの血清刺激活性化ループのリン酸化はPI3キナーゼに依存し,PDK1の共表現によって強化された.
結論:
- PDK1は,PKCzetaとPKCdeltaの活性化ループ部位でのリン酸化を担当しています.
- このリン酸化はPI3キナーゼシグナル伝達によって調節されます.
- PDK1は,テストされたすべてのPKCファミリーメンバーと相互作用し,PKCの調節における広範な役割を果たしていることを示しています.
さらに関連する動画
08:07Identification of Inositol Phosphate or Phosphoinositide Interacting Proteins by Affinity Chromatography Coupled to Western Blot or Mass Spectrometry
Published on: July 26, 2019
10:17A Mass Spectrometry-Based Approach to Identify Phosphoprotein Phosphatases and their Interactors
Published on: April 29, 2022
関連する概念動画
Protein Kinases and Phosphatases
Protein kinases
Many proteins in the cell are regulated by phosphorylation, the addition of a phosphate group. A family of enzymes called kinases...
Phosphoinositides and PIPs
Different phosphoinositides are synthesized and recruited on the cytosolic face of the plasma membrane. The localization of specific phosphoinositides concentrated in separate membrane...
Inhibition of Cdk Activity
The JAK-STAT Signaling Pathway
PI3K/mTOR/AKT Signaling Pathway
cAMP-dependent Protein Kinase Pathways
