通过使用表面张力在现场合成寡核酸阵列
J H Butler1, M Cronin, K M Anderson
1GenePharm Inc., 136 South Wolfe Road, Sunnyvale, CA 94086, USA. jbutler@genospectra.com
Journal of the American Chemical Society
|September 13, 2001
概括
这项研究开发了表面张力阵列,用于玻璃上的 in situ 寡核酸合成. 这种方法可以在定义的位置内进行精确的化学反应,从而实现DNA数组的高合成效率.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 材料科学 材料科学 材料科学
- 表面化学 表面化学
背景情况:
- 寡聚核酸阵列对于基因组学和诊断至关重要.
- 目前的合成方法在空间控制和效率方面面临挑战.
- 需要新的方法来制造高密度,高保真度的寡核酸阵列.
研究的目的:
- 开发和描述一种使用表面张力阵列在现场合成寡核酸的新方法.
- 为了证明玻璃表面化学反应的精确局部.
- 在这些数组上评估基于色胺的寡核酸合成效率.
主要方法:
- 光刻法被用来在玻璃上创建空间地址的圆形特征.
- 不同的表面张力,使用 perfluorosilanated 表面,定义的反应场所.
- 通过接触角度,XPS和TOF-SIMS证实了特征的阿米诺西兰功能化.
- 测量了Oligonucleotide合成效率的步骤产量通过杂交和毛细血管电泳 (CE).
主要成果:
- 表面张力阵列成功地将化学反应局部化到定义的特征.
- 所有四种基 (A,G,C,T) 的平均合成效率为99.9 +/- 1.1%.
- 个别基础效率在97.0%至98.8%之间.
- CE 分析证实了高合效率:98.8% (dT),96.8% (dA) 和96.7% (dC).
结论:
- 表面张力阵列为in situ寡核酸合成提供了一个强大的平台.
- 这种方法为DNA阵列制造提供了精确的空间控制和高保真度.
- 开发的技术具有在诊断和合成生物学中的应用的巨大潜力.
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