通过lentiviral载体传递的转基因的生殖线传播和组织特异表达

科学领域:

• 遗传学和基因组学 遗传学和基因组学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 转基因动物模型对于研究基因功能和疾病至关重要.
• 由于它们的整合能力,病毒载体为基因操纵提供了一个有前途的工具.

研究的目的:

• 开发一种高效的方法,利用lentiviral载体生成转基因小鼠和老鼠.
• 评估转基因动物基因表达的无处不在和细胞特异性促进剂的疗效.

主要方法:

• 在试验室中,单细胞小鼠胚胎感染了编码绿色光蛋白 (GFP) 基因的复合性隐形病毒载体.
• 利用无处不在的,肌肉特异的和T淋巴细胞特异的促进剂来驱动GFP表达.
• 对转基因整合,表达水平和创始老鼠及其后代遗传的分析.
• 使用相同的lentiviral载体系统生成转基因大鼠.

主要成果:

• 80%的创始老鼠携带至少一个转基因拷贝.
• 90%的转基因小鼠表现出高水平的GFP表达.
• 后代成功地继承了转基因,并显示出绿色光.
• 细胞特异性促进剂导致高GFP表达,仅在向细胞类型 (肌肉和T淋巴细胞) 中.
• 成功生成了转基因大鼠,表达了高水平的GFP.

结论:

• 病毒载体介导转基因是产生转基因小鼠和老鼠的有效方法.
• 该系统允许精确控制基因表达,使用细胞特异性或无处不在的促进剂.
• 这种技术有可能为各种研究应用创造多样化的转基因动物模型.