一种基于光的方法,用于直接测量生物聚合物中亚微秒内分子接触形成的情况:一项使用多的探索性研究
Robert R Hudgins1, Fang Huang, Gabriela Gramlich
1Departement Chemie, Universität Basel, Klingelbergstrasse 80, CH-4056 Basel, Switzerland.
Journal of the American Chemical Society
|January 24, 2002
概括
一种新的光氨基酸衍生物 (Fmoc-DBO) 能够精确测量聚中的分子内接触形成率. 这种方法利用2,3-diazabicyclo[2.2.2]oct-2-ene (DBO) 光体的长光寿命进行准确的生物聚合物动力学研究.
科学领域:
- 生物化学和生物物理学
- 化学生物学 化学生物学
- 聚合物科学 聚合物科学
背景情况:
- 测量分子内接触形成率对于理解生物聚合物动态和功能至关重要.
- 现有的方法可能在准确性,时间范围或实验条件上有局限性.
- 开发具有可取性质的新型光探针对于推进生物物理技术至关重要.
研究的目的:
- 为了合成和表征一种新的光氨基酸衍生物,Fmoc-DBO,用于生物物理应用.
- 开发和验证一种基于光的方法,用于测量聚类中的分子内端到端接触形成率.
- 调查聚结构和灵活性对接触形成动态的影响.
主要方法:
- 合成Fmoc-DBO,一种含有2,3-diazabicyclo[2.2.2]oct-2-ene (DBO) 基的光氨基酸衍生物.
- 制备不同长度和序列的多,结合DBO和内在光灭器 (Tryptophan).
- 利用与时间相关的单光子计数,激光闪光光分析和稳态度测量来测量光灭动力学.
- 研究了DBO与各种氨基酸的双分子火效率.
主要成果:
- Fmoc-DBO具有极长的光寿命 (325 ns 在H2O中,505 ns 在D2O中).
- ,氨酸,氨酸和氨酸被确定为DBO光的有效灭剂.
- 测量了灵活多 (Trp-(Gly-Ser) n-DBO-NH2) 的分子内接触形成速率常数,范围为1.1至6.8 x 10^7 s^-1.
- 基于聚烯的聚酸显示不显著的火,突出了接触形成的灵活性的重要性.
结论:
- 新的Fmoc-DBO衍生物为生物聚合物动态的光研究提供了一个强大的平台.
- 开发的方法准确地测量了在空气下的水溶液中在快速时间范围内 (100ps1μs) 内的分子内接触形成率.
- 聚的灵活性是有效的分子内探针灭器相互作用和可测量的灭的关键决定因素.


