设计和制造具有自我粘附能力的谷氨胺结合蛋白,用于未经修改的疏水表面,作为无试剂的光传感器
Akira Wada1, Masayasu Mie, Masuo Aizawa
1Department of Biological Information, Graduate School of Bioscience and Biotechnology, Tokyo Institute of Technology, 4259, Nagatsuta, Midori-ku, Yokohama, 226-8501, Japan.
Journal of the American Chemical Society
|December 25, 2003
概括
经过化学修饰的谷氨胺结合蛋白 (QBP) 与一种疏水性多 (E12) 融合,可以创建新的光生物传感器. 这些传感器在未经修改的表面上有效检测谷氨胺度,从而实现高通量测定.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 蛋白质工程使生物分子检测生物传感器的开发成为可能.
- 结蛋白可以被修改为创建特定的分子传感器.
- 表面固定技术对于开发强大的生物传感器平台至关重要.
研究的目的:
- 构建和描述新的光标记的谷氨胺结合蛋白 (QBP) 衍生物.
- 开发一种表面粘附的聚变蛋白,用于无试剂的光传感器.
- 为了创建一个高通量测定检测谷氨胺度.
主要方法:
- 用光染料 (IAANS,acrylodan,IANBD) 化学修饰单一的氨酸突变型氨酸结合蛋白 (N160C QBP).
- 通过 (Gly4-Ser) n间隔器 (GSn) 将修饰的N160C QBP与一种疏水性多 (E12) 进行基因融合.
- 在胺结合时光变化的表征和微板表面粘附性质的评估.
主要成果:
- 光标记的N160C QBP显示在胺结合后光变化增强.
- 融合蛋白 (N160C QBP-GSn-E12) 证明了对未经修改的微板的疏水表面的粘附性.
- 标有IANBD标签的N160C QBP-GS1-E12表现出可复制的粘附性和光和谷氨酸度 (0.1-50微米) 之间的精确相关性.
结论:
- 使用E12开发的融合蛋白策略能够在未经修改的表面有效地固定蛋白质.
- 这种技术适用于创建用于高通量测试的微板和阵列.
- 无试剂光传感器为检测各种化学和生物样本提供了一个有希望的方法.
