结合微流体网络和基阵列进行多酶检测
Jing Su1, Michelle R Bringer, Rustem F Ismagilov
1Department of Chemistry, The University of Chicago, Illinois 60637, USA.
Journal of the American Chemical Society
|May 19, 2005
概括
这项研究引入了微流体网络,用于制备微阵列,并进行无标签的酶测定. 这种方法可以使用质谱法同时对酶活动进行小规模的评估.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 微流体学 微流体学
背景情况:
- 酶测试对于理解生物过程至关重要.
- 目前的方法可能因规模和吞吐量而受到限制.
- 无标签检测在测试开发中具有优势.
研究的目的:
- 开发一个微流体平台,用于片微阵列的制备和酶测试.
- 为了使酶活动的无标签,高通量分析.
- 为了证明这个平台对生物样本分析的有用性.
主要方法:
- 使用微流体网络 (muFNs) 与聚二甲基) 盖章,用于在自组装单层 (SAM) 上的固定.
- 采用垂直微通道设计,用于引入酶溶液与固定相互作用.
- 集成矩阵辅助激光脱/电离质谱仪 (MALDI-MS) 用于无标签检测酶活性.
主要成果:
- 成功准备了微阵列,并在亚微升尺度上进行了无标签的酶测定.
- 证明了对多种酶基质相互作用的同时评估.
- 应用该系统测定人体K562细胞提取物中的酶和酶/酸酶.
结论:
- 结合muFN,SAM和MALDI-MS,为酶活性分析提供了一个灵活而高效的平台.
- 这种方法可以在复杂的生物样本中对酶活动进行敏感的,无标签的分析.
- 开发的系统推进了高通量选和酶功能的表征.
