基转移酶对蛋白质提取程序的异常耐药性
H F Noller1, V Hoffarth, L Zimniak
1Sinsheimer Laboratories, University of California, Santa Cruz.
概括
核糖体基转移酶活性对键形成至关重要,对蛋白质去除方法表现出显著的抗性. 这表明核糖体RNA在这种必要的催化功能中起着重要作用.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
- 微生物学 微生物学
背景情况:
- 基转移酶催化在核糖体内形成键.
- 传统的从核酸复合体中去除蛋白质的方法通常会使这种酶失活.
研究的目的:
- 为了研究基转移酶活性对各种生化治疗的耐药性.
- 探索核糖体RNA在基转移酶功能中的潜在作用.
主要方法:
- 利用"碎片反应"试验来测量基转移酶活性.
- 应用的处理包括蛋白酶K,SDS,提取和EDTA到细菌核糖体和子单元.
- 通过特定抗生素 (氨基醇,碳胺) 和核糖酶T1.1进行测试的抑制.
主要成果:
- 在蛋白酶K/SDS处理后,大肠杆菌核糖体保留了20-40%的活性,但在提取或EDTA暴露后失去了它.
- 即使在进行了广泛的蛋白酶K/SDS和治疗后,Thermus aquaticus核糖体仍然保持了80%以上的活性.
- 活性被基转移酶抗生素特别抑制,并被核糖核酶T1.1.取消.
结论:
- 基转移酶对去除蛋白质的程序表现出显著的抗性.
- 对RNase T1的稳定性和灵敏性表明23S核糖体RNA在基转移酶催化中发挥着直接作用.
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