人类双链RNA激活蛋白激酶的分子克隆和表征,这种蛋白激酶由干扰素诱导
1Institut Pasteur Unité d'Oncologie Virale-URA CNRS 1157, Paris, France.
Cell
|July 27, 1990
概括
研究人员克隆并对双链 (ds) RNA激活蛋白激酶 (p68激酶) 的cDNA进行了表征. 这种干扰素诱导的酶在抑制蛋白质合成中起着关键作用.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生化学
- 病毒学 病毒学
背景情况:
- 干扰素在人体细胞中诱导一个68kDa的蛋白质 (p68激酶).
- 激活的p68激酶酸化物eIF2,抑制蛋白质合成的开始.
- 精确的分子机制和p68激酶调节的遗传基础需要进一步阐明.
研究的目的:
- 通过分子克隆和表征编码人类p68激酶的互补DNA (cDNA).
- 为了确定p68激酶的全长氨基酸序列.
- 为了研究克隆的p68激酶的功能性质.
主要方法:
- 多个相关的cDNA的分子克隆.
- RNA分析以确定干扰素诱导的转录.
- 从cDNA中推断氨基酸序列.
- 在体外翻译重建的全长cDNA.
- 对dsRNA结合和自酸化的生物化学测试.
主要成果:
- 隔离了几种cDNA,所有这些都对应于2.5 kb的RNA强烈受到干扰素的诱导.
- 推断的氨基酸序列预测了一种550氨基酸蛋白质,具有保存的蛋白质激酶域,包括一种氨酸/氨酸催化域.
- 在体外翻译p68激酶 (68kDa) 结合的dsRNA,被特定的单克隆抗体识别,并经过自化.
结论:
- 这项研究成功地识别和表征了人类p68激酶的分子基础.
- 克隆的p68激酶表现出关键的功能特征,包括dsRNA结合和自酸化.
- 这些发现为了解p68激酶在干扰素介导的抗病毒反应和蛋白质合成调节中的作用提供了基础.
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