通过逆转录酶和聚合酶连锁反应检测周围血液中的黑色素瘤细胞
B Smith1, P Selby, J Southgate
1Yorkshire Cancer Research Campaign Institute for Cancer Studies, St James's University Hospital, Leeds, UK.
Lancet (London, England)
|November 16, 1991
概括
检测循环的瘤细胞是一项挑战. 这项研究开发了一种高度敏感的方法,使用逆转录酶和聚合酶链反应 (PCR) 来检测血液中的铁酶基因转录,表明黑色素瘤转移.
科学领域:
- 在瘤学瘤学.
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 转移包括癌细胞通过血液传播.
- 目前用于循环瘤细胞 (CTC) 的检测方法缺乏足够的灵敏度.
- 早期发现CTC对于有效的癌症管理至关重要.
研究的目的:
- 开发一种敏感的分子检测方法,用于检测周围血液中的循环瘤细胞 (CTC).
- 为了确定一个可靠的生物标志物来检测转移性癌症的存在.
- 建立一种适用于各种癌症类型的方法.
主要方法:
- 利用逆转录酶从外围血液信使RNA (mRNA) 合成辅助DNA (cDNA).
- 使用聚合酶链反应 (PCR) 来放大瘤特异性基因转录.
- 向铁酶基因,这是一种特定于黑色素细胞的标记物,用于检测黑色素瘤细胞.
主要成果:
- 该测试显示出高灵敏度,在2毫升血液中检测出来自细胞系的单个黑色素瘤细胞.
- 从7名患有恶性黑色素瘤的患者中,4名的血液样本中观察到积极的结果.
- 所有对照对象 (健康人群和患有其他癌症的患者) 均得出负结果.
结论:
- 开发的方法通过识别周围血液中的铁酶基因转录来准确检测循环中的黑色素瘤细胞.
- 这种方法提供了一种敏感的非遗传方法,通过向组织特定的基因来检测各种癌症,包括上皮癌.
- 该技术有可能用于癌症诊断,预后评估和残留疾病监测.
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PCR - Polymerase Chain Reaction
Overview
Real Time RT-PCR
Real-time reverse transcription-polymerase chain reaction, or Real-time RT-PCR, is an analytical tool used to determine the expression level of target genes. The method involves converting mRNA to complementary DNA with the help of an enzyme known as reverse transcriptase, followed by the PCR amplification of the cDNA. These two processes can be performed simultaneously in a single tube or separately as a two-step reaction.
The real-time quantification of the number of amplified products is...
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