一个全基因组的转基因RNAi库用于Drosophila中的条件基因失活

科学领域:

• 遗传学 是一个遗传学.
• 分子生物学分子生物学
• 发育生物学 发展生物学

背景情况:

• 在模型生物中进行前进的遗传选已经对生物过程产生了重大洞察力.
• 使用RNA介导基因干扰 (RNAi) 的逆基因查是强大的工具,但全基因组应用仅限于培养细胞或无处不在的基因失活.
• 在完整的生物体中使用RNAi进行组织特异性功能分析一直是研究能力的重大差距.

研究的目的:

• 在Drosophila melanogaster中创建一个全基因组RNAi库,用于条件的,组织特定的基因失活.
• 为了使基因功能在特定组织的系统调查在整个生物体的寿命.

主要方法:

• 用短基因片段作为反向重复克隆的Drosophila melanogaster RNAi转基因的全基因组图书馆的生成.
• 通过二进制GAL4/UAS系统控制的RNAi转基因的表达,用于条件的,组织特异性的基因失活.
• 通过分子和表型分析验证转基因功能.

主要成果:

• 产生了22270个转基因基因的图书馆,覆盖了Drosophila.的88%预测的蛋白质编码基因.
• 大多数产生的RNAi转基因通过分子和表型分析被证实是功能性的.
• 该图书馆在完整的Drosophila生物体的特定组织中促进了条件基因失活.

结论:

• 开发的Drosophila RNAi库为系统的,组织特定的功能基因组学提供了一个强大的平台.
• 这种资源为研究组织特异水平的发育,生理学和病理学中的基因功能开辟了新的途径.
• 该图书馆显著提高了复杂的多细胞生物体反向基因查的能力.