对在黄金表面上纳米植入的蛋白质的生物化学活性进行验证
Cristian Staii1, David W Wood, Giacinto Scoles
1Department of Chemistry, Princeton University, Princeton, New Jersey 08544, USA. cstaii@princeton.edu
Journal of the American Chemical Society
|December 18, 2007
概括
我们开发了一种新的蛋白质纳米生物传感器,使用原子力显微镜 (AFM) 和纳米移植来检测马尔. 这种方法使马尔托结合蛋白 (MBP) 固定,同时保持其生物活性,用于敏感,可重复的测量.
科学领域:
- 生物物理学的生物物理.
- 纳米技术 纳米技术
- 生物感应是一种生物感应.
背景情况:
- 蛋白质固定对于生物传感器的发展至关重要.
- 控制蛋白质的方向和空间布局是一项挑战.
- 原子力显微镜 (AFM) 提供高分辨率的表面特征.
研究的目的:
- 为了证明基于AFM的纳米移植对动不动的二氨酸终结型马尔托结合蛋白 (MBP-cys-cys).
- 描述固定MBP的in situ生物活性和带结合.
- 开发一种敏感的纳米生物传感器,用于检测马尔.
主要方法:
- 使用纳米移植精确地将MBP-cys-cys放在金基板上.
- 采用AFM来检测通过摩擦力变化在马尔托斯结合时MBP的构造变化.
- 重生固定蛋白质并评估响应的可重复性.
主要成果:
- 成功固定了MBP-cys-cys,并保持了生物活性.
- 证实固定化方法 (半二,纳米移植,黄金基质相互作用) 不会影响蛋白质功能.
- 确定MBP-cys-cys/马尔托斯系统的解离常数 (kd) 为1 +/- 0.04μM.
- 实现了马尔托糖的attogram级检测,显示出一个敏感的纳米生物传感器.
结论:
- 基于AFM的纳米移植对于创建功能性蛋白质纳米模式是有效的.
- 该MBP-cys-cys系统作为一种敏感和可重复的表面纳米生物传感器用于麦芽糖.
- 这种方法对制造分子级生物传感器具有重大意义.
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