从S. cerevisiae中克隆和表达聚A) 聚合酶的基本基因

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 是一个遗传学.
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 聚甲基聚合酶对于真核生物中的信使RNA (mRNA) 成熟至关重要.
• 它将腺残留物添加到前体RNA的3'端,这是一个涉及内核分解裂变的过程.
• 虽然mRNA 3'处理被保存,但在预mRNA中的识别信号在酵母和更高的真核生物之间有所不同.

研究的目的:

• 为了克隆编码酵母多聚合酶的基因.
• 为了描述克隆的酵母多A) 聚合酶.
• 为了比较酵母多A聚合酶与其哺乳动物同类.

主要方法:

• 基因克隆技术被用来分离酵母多A) 聚合酶基因.
• 在大肠杆菌中的重组表达被用来产生酶.
• 纯化重组酶被分析为物理和生物化学性质.

主要成果:

• 酵母多A) 聚合酶的基因已成功克隆.
• 该基因是一个单一的,必不可少的基因,位于11号染色体上,靠近中间体.
• 再组合酵母聚聚合酶表现出与原生酶相同的物理和生化特性.
• 序列分析显示了酵母和哺乳动物多A) 聚合酶之间的保存特征.

结论:

• 酵母多分子酶基因的克隆和表征为研究mRNA处理提供了关键资源.
• 这些发现突显了酵母和哺乳动物之间的多聚酶结构和功能的进化保存.
• 这项工作有助于对不同真核生物体的mRNA 3'端形成进行比较研究.