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表达式cDNA克隆KGF受体,通过创建一个转化自环
T Miki1, T P Fleming, D P Bottaro
1Laboratory of Cellular and Molecular Biology, National Cancer Institute, Bethesda, MD 20892.
Science (New York, N.Y.)
|January 4, 1991
概括
研究人员使用表达克隆分离了角质细胞生长因子 (KGF) 受体cDNA. 这种方法确定了一种新型的氨酸激酶受体,对KGF和酸性FGF具有很高的亲和力,适用于其他信号通路.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 细胞信号传递 细胞信号传递
- 受体氨酸激酶受体 氨酸激酶受体
背景情况:
- 角质细胞生长因子 (KGF) 是一种表皮细胞特异性的线粒原体.
- 识别KGF受体对于理解上皮细胞生长调节至关重要.
- 纤维细胞生长因子 (FGFs) 在细胞增殖和分化中起着重要作用.
研究的目的:
- 设计一种表达式克隆策略,以分离KGF受体的互补DNA (cDNA).
- 描述隔离的KGF受体的结合特性和分子性质.
主要方法:
- 传染NIH/3T3纤维细胞与状细胞表达cDNA库.
- 基于特定的高亲缘关系KGF结合的转化焦点的选择.
- 对与相关纤维细胞生长因子 (FGFs) 进行约束竞争的分析.
- 拯救和测序编码受体的4.2千基cDNA.
主要成果:
- 成功分离了编码KGF受体的4.2基基基DNA.
- 该受体对KGF和酸性FGF都表现出高亲和度的结合.
- 编码的蛋白质是横跨膜的氨酸激酶,与基本的FGF受体相关但与之不同.
- 证明了克隆表达对隔离信号通路基因的有用性.
结论:
- 表达式克隆策略是有效的隔离生长因子受体cDNAs.
- 已识别的KGF受体是一种具有广泛FGF结合特异性的新型铁氨酸激酶.
- 这种方法可以广泛应用于识别基因在限制步骤的线粒生成信号通路的基因.