通过重新编程的人类脂素2重新编程的人类酸复合物的高亲和度识别
Hyun Jin Kim1, Andreas Eichinger, Arne Skerra
1Lehrstuhl für Biologische Chemie, Technische Universität München, Freising-Weihenstephan, Germany.
Journal of the American Chemical Society
|February 21, 2009
概括
工程化利波卡林2 (Lcn2) 变种结合稀土金属,如 (Y),具有很高的医学成像和治疗的亲和力. 这些稳定,工程蛋白质为放射性核素化和有针对性的输送提供了新的策略.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 蛋白质工程是指蛋白质工程.
- 医学同位素 医学同位素
背景情况:
- 人类脂素2 (Lcn2),也称为中性粒细胞凝酶相关的脂素 (NGAL),自然结合细菌 siderophores.
- 设计Lcn2以结合金属酸盐复合物可以为医疗应用创造新的工具.
研究的目的:
- 设计Lcn2变种,能够特异地结合与DTPA复合的稀土金属离子.
- 开发基于Lcn2的模块,用于诊断和治疗中的放射性核酸化.
主要方法:
- 针对Lcn2的带口袋残留物的有针对性的随机突变发生.
- 使用细菌菌体显示和大肠杆菌菌落查来选择结合变体.
- 使用ELISA和表面等离子体共振进行体外亲和力成熟和表征.
主要成果:
- 对于-DTPA,产生了一种Lcn2变体,其解离常数为400 pM.
- 设计的Lcn2特别识别了DTPA复合的Y{3+},Tb{3+},Gd{3+}和Lu{3+).
- X射线结晶学揭示了工程Lcn2变体的结合模式和结构完整性.
结论:
- 工程Lcn2变种是稳定的,高产量的蛋白质,能够进行高亲和度金属化.
- 这些变体代表了在医学诊断和治疗中放射性核素酸盐策略的有希望的模块.
- 突出的功能化的DTPA侧链允许与其他分子结合,扩大潜在的应用.
