大肠杆菌K-12的vsr基因产物是一种特定于链和序列的DNA不匹配内核酶

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• DNA 修复机制的修复机制
• 酶学 是一种酶学.

背景情况:

• 大肠杆菌 K-12 Dcm 甲基转移酶在 CCA/TGG 序列中甲基化细胞素.
• 5-甲基细胞素的脱胺产生了胺,导致T / G不匹配,一种变异前的病变.
• VSP (非常短补丁) 修复途径纠正了这些T / G不匹配,涉及vsr,polA,mutL和mutS基因.

研究的目的:

• 为了将Vsr基因产物描述为DNA不匹配的内核酶.
• 阐明Vsr内核酶在启动VSP不匹配修复中的作用.

主要方法:

• 净化和表征Vsr基因产品.
• 在体外试验测试以确定Vsr内核酶在不匹配的DNA基板上的切割活性.

主要成果:

• Vsr蛋白 (Mr 18,000) 作为一个DNA不匹配的内核酶.
• Vsr内核酶特别切断CTA/TGN或NTA/TGG序列的双链DNA,这些序列与蒂米丁-瓜诺辛不匹配相邻.
• 切割活动取决于不匹配的存在,并且是线程特定的.

结论:

• Vsr内核酶是一种新的酶,可以启动VSP不匹配修复途径.
• 由Vsr内核酶进行的链特异性切割对于将修复引导到正确的DNA链至关重要.