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通过无对键与11-cis-视网膜染色体的罗多普辛激活转化素
E A Zhukovsky1, P R Robinson, D D Oprian
1Graduate Department of Biochemistry, Brandeis University, Waltham, MA 02254.
概括
连接视网膜与罗多普辛的共价键对于染色体结合或光激活信号传递并不重要. 缺乏这种结合的突变体仍然会形成功能性视觉颜料,激活转化素.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 视觉科学 视觉科学 视觉科学
背景情况:
- 罗多普辛是一种与G蛋白结合的受体,通过一种共价质质型的希夫基结,通过其联体11-cis-retinal与Lys-296.6独特结合.
- 其他G蛋白结合受体利用非共价相互作用来结合激动剂.
研究的目的:
- 调查共价希夫基链接对于罗多普辛功能的必要性.
- 为了确定共价键是否对染色体结合和转素激活至关重要.
主要方法:
- 两种罗多素突变的构造:K296G和K296A,缺乏共价链接.
- 用11-cis-retinal和n-alkylamine Schiff基进行突变的复制.
- 测量复制色素的吸收光谱.
- 检测依赖光的转素激活通过复制的颜料.
主要成果:
- 突变K296G和K296A在制后形成了类似于野生型罗多素的吸收光谱的颜料.
- 由K296G和11-cis-retinal的n-propylamine Schiff基形成的颜料表现出依赖光的转化素激活.
- 这种激活达到野生类型蛋白质特异活性的30-40%.
结论:
- 对于11-cis-视网膜染色体与罗多普辛的结合,共价键并不必不可少.
- 同样,对转化素以光依赖的方式的催化激活不需要共价连接.
- 这些发现挑战了对罗多普辛结构功能关系的传统理解.