一个点击化学调解的体内活性探针探测二甲基氨基二甲基氨基酸酶
Yun Wang1, Shougang Hu, Walter Fast
1Division of Medicinal Chemistry, University of Texas, Austin, Texas 78712, USA.
Journal of the American Chemical Society
|November 19, 2009
概括
研究人员开发了一种基于活动的新型探针来研究二甲基氨酸二甲基氨基-1 (DDAH-1). 该工具有助于分析DDAH-1活动,这对于了解心血管疾病和内皮功能障碍至关重要.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 心血管研究研究心血管研究
背景情况:
- 非对称的N ((omega),N ((omega) -二甲基-l-氨酸 (ADMA) 是一种内源性氧化合成酶抑制剂和心血管疾病生物标志物.
- 双甲基氨基二甲基氨基酶 (DDAH) 异型调节ADMA水平;DDAH失调有助于内皮功能障碍.
研究的目的:
- 开发和验证一种基于活性的新型探针,用于研究DDAH-1酶活性.
- 为在各种生理和病理条件下提供分析DDAH-1的工具.
主要方法:
- 合成了一个由两部分组成的,点击化学介导的基于活动的探针 (N-but-3-ynyl-2-chloroacetamidine).
- 该探针用于标记myc标记的DDAH-1在HEK 293T细胞中.
- 两种颜色的西式涂抹测定了DDAH-1抑制剂的体内IC ().
主要成果:
- 探测器成功标记了活跃的DDAH-1,但没有标记不活跃的突变物或抑制的酶.
- 这项研究确定了可逆DDAH-1抑制剂的体内IC50),证实了其生物可用性和活性位点竞争.
- 开发的探头是有效的分析DDAH-1活动.
结论:
- 开发了一种基于DDAH-1的基于点击化学的基于活动的新型探针.
- 这种探针是研究DDAH-1在健康和疾病中的功能的一个有价值的工具.
- 使用这种探针进行进一步的研究可以阐明DDAH-1在内皮功能障碍和心血管疾病病因学中的作用.
