相关实验视频
Updated: Jun 18, 2026

11:13
Identification of Kinase-substrate Pairs Using High Throughput Screening
Published on: August 29, 2015
高通量选以确定稳定p38alpha中非活性激酶构造的抑制剂
Jeffrey R Simard1, Christian Grütter, Vijaykumar Pawar
1Chemical Genomics Centre of the Max Planck Society, Otto-Hahn-Strasse 15, D-44227 Dortmund, Germany.
Journal of the American Chemical Society
|December 3, 2009
概括
这项研究选了非活性的人类p38alpha MAP激酶,以找到新的小分子激酶抑制剂. 该试验确定了稳定DFG-out形状的化合物,这是传统方法错过的.
科学领域:
- 药用化学 医学化学
- 化学生物学 化学生物学
- 结构生物学 结构生物学
背景情况:
- 激酶抑制剂对于调节研究中的激酶活性至关重要.
- 传统的高通量查 (HTS) 通常只能识别ATP竞争型I型抑制剂.
- 激酶功能依赖于活性和非活性构造之间的结构过渡.
研究的目的:
- 开发一种新的HTS试验,用于识别针对特定形状的激酶抑制剂.
- 使用酶性无活性的p38alpha MAP 激酶选一个小分子库.
- 为了发现药理学上理想的DFG-out形状的稳定剂.
主要方法:
- 高通量选约35,000个小型有机分子.
- 使用一种使用酶性无活性的人类p38alpha MAP激酶的测试系统.
- 蛋白质X射线晶体学以确定命中化合物的结合模式.
主要成果:
- 确定了稳定或诱导p38alpha MAP激酶的DFG-out形态的小分子.
- 结构性表征揭示了被击中化合物如何与激酶相互作用.
- 一些经过验证的命中化合物没有被常规酸化试验检测到.
结论:
- 使用非活性激酶制剂的查为抑制剂的发现提供了独特的灵敏度.
- 开发的测试系统成功地识别出了新激酶抑制剂,而经典方法却没有发现.
- 这种方法扩大了发现药理学上相关的激酶调节剂的潜力.

