用户装载的SlipChip用于无设备的多重复合纳米升规模实验
Liang Li1, Wenbin Du, Rustem Ismagilov
1Department of Chemistry and Institute for Biophysical Dynamics, The University of Chicago, 929 East 57th Street, Chicago, Illinois 60637, USA.
Journal of the American Chemical Society
|December 17, 2009
概括
一个新的SlipChip使多重纳米升实验成为可能,优化了用最小样本进行蛋白质结晶选. 这种微流体方法成功地确定了结晶条件,并产生了更高分辨率的蛋白质结构.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 微流体学 微流体学
- 结构生物学 结构生物学
背景情况:
- 多复合的纳米升级实验需要精确的流体处理.
- 选结晶条件传统上需要大量的样本量和资源.
研究的目的:
- 开发和验证一个用户装载的,无设备的SlipChip,用于多重纳米升级实验.
- 使用微流体学优化蛋白质结晶选和结构确定.
主要方法:
- 采用SlipChip设计,以各种比例控制样品与试剂的混合.
- 蛋白质结晶选使用大约10微升的谷氨基CoA脱酶进行.
- 结晶条件被确定并扩大规模,用X射线衍射分析晶体.
主要成果:
- 该SlipChip成功选了528个条件,以检测谷氨酸CoA脱酶结晶的情况.
- 鉴定的条件导致了成功的结晶和更高分辨率的蛋白质结构确定.
- 该SlipChip证明了可靠的流体处理在各种物理化学性质.
结论:
- 用户加载的SlipChip是一个多功能平台,用于纳米升规模的实验,特别是蛋白质结晶.
- 这种微流体方法减少了样品消耗,并增强了结构生物学研究.
- 该技术有望用于酶动力学,基于细胞的测试和化学反应的应用.
