相关实验视频
通过细胞蛋白抑制HIV-1转录
H Kato1, M Horikoshi, R G Roeder
1Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology, Rockefeller University, New York, NY 10021.
Science (New York, N.Y.)
|March 22, 1991
概括
一种细胞DNA结合蛋白,LBP-1,通过结合一个关键的促进子部位来抑制人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 的转录. 这种相互作用可能对确定HIV-1潜伏期至关重要.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 病毒学 病毒学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 促进体含有控制病毒转录的调节元素.
- 细胞因子在调节病毒基因表达和病变发生方面发挥着至关重要的作用.
研究的目的:
- 研究细胞DNA结合蛋白LBP-1在调节HIV-1转录中的作用.
- 阐明LBP-1与HIV-1促进体相互作用的机制.
主要方法:
- 在试管体内转录测试使用纯化的LBP-1和促进体DNA.
- 电泳运动转移试验 (EMSAs) 用于研究蛋白质-DNA相互作用.
- 在HIV-1促进体内的LBP-1结合位点的位点定向突变发生.
- 在稳定转化细胞系中对HIV-1转录的分析.
主要成果:
- LBP-1以度依赖的方式与 HIV-1 转录起点周围的两个位点结合.
- 纯化的LBP-1通过与TATA元素重叠的上游部位 (部位II) 结合来抑制体外HIV-1转录.
- 抑制依赖于LBP-1与II位点的结合,并且可以通过TATA-结合因子 (TFIID) 阻止.
- 突变破坏了LBP-1与II位点的结合,消除了体外抑制,并增强了细胞中的HIV-1转录.
结论:
- 通过与II部位的相互作用,LBP-1作为HIV-1转录的抑制剂,可能抑制TFIID结合.
- 这种细胞调节机制类似于细菌抑制活性,可能导致HIV-1潜伏期.