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净化,克隆,表达和生物特征的一种互白素-1受体对手蛋白质
D B Carter1, M R Deibel, C J Dunn
1Department of Molecular Biology Research, Upjohn Company, Kalamazoo, Michigan 49007.
Nature
|April 12, 1990
概括
研究人员分离并测序了介素-1 (IL-1) 受体对抗蛋白 (IRAP). 再组合IRAP在体外和体内有效地阻断了IL-1活性,证明了其作为IL-1抑制剂的潜力.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 介质素-1 (IL-1) 是一种关键的细胞因子,参与炎症和免疫反应.
- IL-1受体对抗蛋白 (IRAP) 是一种天然存在的IL-1抑制剂.
- 了解IRAP的功能和产量对于开发向疗法至关重要.
研究的目的:
- 从人类细胞系中净化和鉴定IL-1受体对抗蛋白 (IRAP).
- 克隆和测序编码IRAP的互补DNA (cDNA).
- 为了表达重组IRAP并评估其对IL-1的抑制活性.
主要方法:
- 从U937细胞中净化和部分测序IRAP.
- 对IRAP编码cDNA进行克隆和测序.
- 重组IRAP在大肠杆菌中的表达.
- 在体外测试测量IL-1结合和生物活性的抑制.
- 在体内研究评估IL-1诱导的皮质类固醇生产的抑制.
主要成果:
- 从U937人类骨髓单细胞细胞系成功净化了IRAP.
- 编码IRAP的cDNA被克隆和测序.
- 再组合IRAP可以竞争性地抑制IL-1与其受体的结合.
- 再组合IRAP在体外证明了对T细胞和内皮细胞IL-1生物活性的特定抑制.
- 再组合IRAP在体内强烈抑制了IL-1诱导的皮质激素的产生.
结论:
- 该研究成功地表征并产生了功能性重组IRAP.
- 重组IRAP是一种有效的IL-1活性抑制剂,在体外和体内都有效.
- 对于IL-1介导的疾病来说,IRAP是一个有前途的治疗标.