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由大肠杆菌乳液抑制剂阻断的RNA聚合酶II转录
U Deuschle1, R A Hipskind, H Bujard
1Zentrum für Molekulare Biologie, Universität Heidelberg, Federal Republic of Germany.
Science (New York, N.Y.)
|April 27, 1990
概括
研究人员使用基因中的 lac 运算符创建了一个可逆阻断RNA聚合酶II延长的可逆阻断. 这表明蛋白质-DNA复合体如何在转录过程中控制真核生物基因表达.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因规则 基因规则
- 单核细胞转录 单核细胞转录
背景情况:
- RNA聚合酶II (Pol II) 对于真核生物基因转录至关重要.
- 控制Pol II延长是基因表达调节的一个关键机制.
- 了解转录延长提供了对各种生物过程的见解.
研究的目的:
- 在Pol II转录延长中设计可逆阻塞.
- 研究蛋白质-DNA复合体在阻断转录中的作用.
- 为研究真核生物基因表达控制建立一个模型系统.
主要方法:
- 在SV40大T抗原基因的内子中构建一个具有LAC运算子序列的转录单元.
- 将构造物引入表达大肠杆菌乳腺抑制剂的子细胞中.
- 使用乳酸抑制剂和异甲酸 (IPTG) 来调节转录.
- 使用特定结构分析核提取物中的转录长度.
主要成果:
- 在具有乳糖抑制剂和运营者序列的细胞中,T抗原表达减少.
- 抑制作用被IPTG逆转,IPTG是激素的诱导剂.
- 观察到缩短的转录,映射到压抑机-运行器复合体边界.
- 这些较短的RNA也对IPTG诱导敏感.
结论:
- 一个蛋白质-DNA复合体可以有效地阻断RNA聚合酶II通路.
- 该系统为转录延长的可逆控制提供了一个模型.
- 这些发现提供了对真核生物基因表达调节机制的见解.