在转基因小鼠中,贝塔A-环球蛋白基因的位点独立表达

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 是一个遗传学.
• 发展生物学 发展生物学

背景情况:

• 转基因小鼠的基因表达通常因周围染色质引起的"位置效应"而变化.
• 人类β-环球蛋白位置控制区域 (LCR) 在转基因上游时可以取消位置效应.
• 以前的研究强调了上游元素对于一致的基因表达的重要性.

研究的目的:

• 在转基因小鼠中研究控制贝塔A-环球蛋白基因表达的调控元件.
• 为了确定的DNA元素是否可以在哺乳动物系统中赋予位置独立的表达.
• 将调节元件的位置和功能与人类β-环球蛋白LCR的位置和功能进行比较.

主要方法:

• 转基因小鼠的生成携带贝塔A-环球蛋白基因构造.
• 在转基因小鼠的各种组织中分析球蛋白信使RNA (mRNA) 表达水平.
• 与转基因拷贝数和整合部位相关的表达水平的比较.

主要成果:

• 一个4.5千克的片段含有贝塔A-环球蛋白基因及其下游增强剂,确保了所有转基因小鼠的位置独立表达.
• 球蛋白mRNA水平与集成的转基因拷贝数量成比例.
• 这些调节元件位于的βA-环球蛋白基因的2kB以内,与更遥远的人类LCR不同.

结论:

• 的DNA元素可以调解小鼠的位置独立基因表达.
• 一致基因表达的有效调节元素可以位于基因附近,不一定定义基因集群边界.
• 这一发现对基因疗法载体的设计和对跨物种基因调节的理解有影响.