鸟类肉瘤病毒转化细胞上的免疫光:SRC基因产品的局部化

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 病毒学 病毒学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 鸟类肉瘤病毒 src 基因编码一种蛋白质激酶,p60src,涉及到细胞转化.
• 了解p60src精确的细胞定位对于阐明它在病毒瘤发生中的作用至关重要.

研究的目的:

• 通过间接免疫光检测,确定鸟类肉瘤病毒 src 基因产物 p60src 的亚细胞局部.
• 验证抗p60src抗血清的特异性及其在光研究中的实用性.

主要方法:

• 在胚胎纤维细胞 (CEF) 和正常的老鼠 (NRK) 细胞上进行间接免疫光显微镜检测,这些细胞被施密特-鲁宾菌株罗斯肉瘤病毒 (SR-RSV-D) 转化.
• 抗p60src抗血清的特异性通过免疫沉和凝电泳证实.
• 使用乙和甲固定,有或没有阻断病毒结构蛋白.

主要成果:

• 在由SR-RSV-D转换的CEF和NRK细胞中,p60src表现出扩散的细胞质局部化.
• 在甲固定时观察到p60src的特定亚细胞质度.
• 在相邻的转变细胞之间观察到细胞间光模式.
• 在可活转化细胞的表面上没有检测到p60src.
• 没有观察到核光.

结论:

• 禽肉瘤病毒的p60src蛋白主要局限于转化细胞的细胞质中.
• 免疫光是一种可靠的方法来研究p60src定位,固定方法影响观察到的模式.
• 观察到的局部化模式是鸟类肉瘤病毒转化细胞的特征.