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克隆一种转录活性的人类TATA结合因子
C C Kao1, P M Lieberman, M C Schmidt
1Department of Microbiology, Molecular Biology Institute, University of California, Los Angeles 90024-1570.
概括
研究人员克隆了人类转录因子IID (TFIID) 的补充DNA (cDNA),这是真核生物基因表达的关键调节者. 由此产生的TFIID蛋白显示出DNA结合和转录激活能力.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 转录因子IID (TFIID) 对于调节真核生物基因表达至关重要.
- TFIID与TATA盒促进元结合,这是通过RNA聚合酶II启动转录的关键步骤.
研究的目的:
- 为了克隆编码人类TFIID蛋白的互补DNA (cDNA).
- 描述人类TFIID蛋白的功能性质,包括其DNA结合和转录激活能力.
主要方法:
- 编码人类TFIID的补充DNA (cDNA) 被克隆.
- 人类TFIID基因在网细胞溶解物和大肠杆菌中得到表达.
- 对表达的蛋白质进行了DNA结合和转录激活活性分析.
主要成果:
- 产生了339个氨基酸 (37,745达尔顿) 的人类TFIID多.
- 人类的TFIID蛋白与其Saccharomyces cerevisiae对应物在炭基末端区域中具有80%的相同性.
- 氨基末端具有38个谷氨胺残留物的独特重复和X-Thr-Pro重复.
- 表达的蛋白质是功能性的,表现出DNA结合和转录激活.
结论:
- 成功克隆和表达人类TFIID为研究真核生物基因调节提供了有价值的工具.
- 保存的区域和独特的重复表明TFIID功能和演变中的特定角色.
- 功能性蛋白质证实了其在转录启动中的作用,并突出了进一步研究其机制的潜力.