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通过在活性部位的酸化来调节酶
J H Hurley1, A M Dean, J L Sohl
1Department of Biochemistry and Biophysics, University of California, San Francisco 94143-0448.
Science (New York, N.Y.)
|August 31, 1990
概括
大肠杆菌中异酸脱酶酶通过酸化来调节. 在Ser113引入负电荷,模仿酸化,使酶失活,这表明在联结体位点的直接相互作用是关键.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 酶学 是一种酶学.
- 结构生物学 结构生物学
背景情况:
- 来自大肠杆菌的异酸脱酶 (IDH) 是一种通过共价改性调节的关键酶.
- 在Ser113的酸化是这个酶的已知调节机制.
- 了解该法规的结构基础对于酶功能研究至关重要.
研究的目的:
- 通过酸化来研究异酸盐脱酶调节的结构和机制基础.
- 阐明Ser113在酶活性和调节中的作用.
- 探索酶调节的替代机制.
主要方法:
- 用X射线晶体学来确定野生类型和突变酶的三维结构.
- 局部定向的突变发生产生Asp113和Glu113突变物.
- 结构分析和计算计算以评估静电电位变化.
主要成果:
- 与野生类型相比,模仿酸化的Asp113和Glu113突变的结构显示出最小的构造变化.
- 异酸盐在酶基质复合体中与Ser113形成键.
- 计算表明,在Ser113引入负电荷足以使酶失活.
结论:
- 在Ser113中对异酸盐脱酶的酸化通过在连接体结合部位的直接静电效应使酶失活.
- 这种通过直接相互作用调节的机制与涉及形状变化的全调节形成鲜明对比.
- 这些发现提供了通过共价修饰和静电相互作用对酶调节的见解.