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RNA聚合酶II C-终端重复影响对转录增强器信号的反应
1Whitehead Institute for Biomedical Research, Nine Cambridge Center, Massachusetts 02142.
Nature
|October 4, 1990
概括
在RNA聚合酶IIC终端域 (CTD) 中的重复次数对于酵母生长和基因激活至关重要. 较短的CTD损害了酶对调节信号的反应,影响了基因表达.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 酵母遗传学 酵母遗传学
- 基因规则 基因规则
背景情况:
- RNA聚合酶II大子单元具有由七个重复组成的保存的C端域 (CTD).
- CTD重复的数量显著影响Saccharomyces cerevisiae细胞活力和生长条件.
- CTD断绝与功能缺陷有关,而不是蛋白质不稳定.
研究的目的:
- 为了研究改变RNA聚合酶IICTD中七倍重复数的功能后果.
- 确定CTD重复数如何影响酵母促进体上游激活序列的反应.
- 确定对CTD截断敏感的特定监管要素.
主要方法:
- 使用Saccharomyces cerevisiae作为一个模型生物体.
- 在RNA聚合酶IICTD中引入部分删除突变.
- 评估细胞活力,生长表型 (温度和寒冷敏感性) 和内醇辅性.
- 分析酶对特定促进体上游激活序列的反应能力,包括GAL4结合部位.
主要成果:
- 缺乏不到10次CTD重复的酵母细胞是不可行的.
- 具有10-12次CTD重复的细胞表现出对温度和寒冷敏感的生长,并且是内醇辅食基因.
- 部分CTD删除会以促进体特定的方式损害RNA聚合酶II酶对上游激活序列的反应.
- GAL4结合部位对CTD切断敏感,这表明CTD重复数在调解对特定转录因子的反应方面发挥了作用.
结论:
- 在RNA聚合酶IICTD中,七倍重复的数量对于细胞活力和酵母中基因表达的适当调节都至关重要.
- CTD长度通过调节酶与调节元件的相互作用,直接影响促进体激活的效率.
- 这些发现突显了CTD结构-功能关系在真核体转录中的重要性.