通过使用基于亲缘关系的探针,对潜在的达沙提尼布点进行基于细胞的蛋白质组分析
Haibin Shi1, Chong-Jing Zhang, Grace Y J Chen
1Department of Chemistry, National University of Singapore, Singapore 117543.
Journal of the American Chemical Society
|January 17, 2012
概括
研究人员开发了一种新的细胞透探头 (DA-2),用于识别癌症药物标. 这次探测揭示了前所未知的达沙替尼 (Dasatinib) 的瘤药物标,包括几个氨酸/氨酸激酶.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 化学生物学 化学生物学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
背景情况:
- 蛋白激酶调节关键的细胞过程,使它们成为癌症治疗的关键点.
- 达沙替尼是慢性髓性白血病的有效双重Src/Abl抑制剂,但缺乏细胞特异性.
- 目前用于识别酶抑制剂标的现有方法通常是有限的,特别是在活细胞环境中.
研究的目的:
- 开发一种新型的细胞透探头,用于对酶抑制剂标的蛋白质组范围的分析.
- 为了识别激酶抑制剂达沙替尼的新型细胞标.
- 验证开发的探头在活细胞和细胞溶解体系统中的实用性.
主要方法:
- 开发一种细胞透性激酶探针 (DA-2),用于化学分析.
- 使用DA-2在活细胞,细胞溶解物和固定亲和矩阵中进行全蛋白质组范围的目标识别.
- 通过拉下/免疫阻塞和激酶抑制试验验证实已识别的目标.
主要成果:
- 与其他蛋白质组件相比,DA-2 能够识别出明显更多的假定激酶标.
- 确定了新的达沙替尼的点,包括已知的Abl和Src激酶之外的氨酸/氨酸激酶 (PCTK3,STK25,eIF-2A,PIM-3,PKA C-α,PKN2).
- 探测器保持了高度调节的,细分的激酶-药物相互作用.
结论:
- 开发的DA-2探头有效用于活细胞中激酶抑制剂的蛋白质组范围的分析.
- 确定了达沙替尼的新激酶标,扩大了我们对其作用机制的理解.
- 这种方法适用于研究其他可逆药物和候选药物.
