在因特因前体中的催化半氨酸之间存在分子内二硫化键
Wen Chen1, Lingyun Li, Zhenming Du
1Department of Biology, Center for Biotechnology and Interdisciplinary Studies, Rensselaer Polytechnic Institute, Troy, New York 12180, USA.
研究人员在Pyrococcus abyssi PolII中发现了一种抑制蛋白质拼接的二硫化键. 降解剂打破了这种键,使拼接成为可能,并建议对整体功能的氧化还原控制.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 结构生物学 结构生物学
背景情况:
- 蛋白质拼接是通过intins介导的关键的翻译后修饰.
- 基因催化它们自己的切除和侧面基因的结合.
- 了解蛋白质调节是控制蛋白质功能的关键.
研究的目的:
- 为了研究一种新型的分子内二硫化物键在超热友实体中的结构和功能含义.
- 阐明这种二硫化键影响蛋白质拼接活动的机制.
- 探索这种二硫化键在整蛋白功能的氧化还原介导调节中的潜在作用.
主要方法:
- 局部导向的突变发生来探测囊素的作用.
- 使用降解剂的治疗,如三2-碳氧乙烯) 斯芬 (TCEP).
- 液体染色学-质谱学 (LC-MS/MS) 用于二硫化物键的识别.
主要成果:
- 在Pyrococcus abyssi PolII中蛋白前体中,首次发现了活性部位囊蛋白 (Cys1和Cys+1) 之间的分子内二硫化键.
- 通过LC-MS/MS和突变发生的研究证实了二硫化键.
- 二硫化物键形成显著抑制蛋白质拼接,可以通过减少恢复.
- 二硫化物键的稳定性受到外蛋白相互作用和温度的影响.
结论:
- 一个分子内二硫化键作为蛋白质拼接的强有力的抑制剂在研究中的蛋白质.
- 减少条件可以克服这种抑制,这表明一个氧化还原开关机制.
- 蛋白质可能具有对氧化还原敏感的调节元件,控制它们的催化活性和蛋白质功能.
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