在体内通过动态调节的基于活动的探针确认可逆抑制剂的目标接触

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 化学生物学 化学生物学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 在活体中评估小分子抑制剂向参与对于酶功能的研究至关重要.
• 缺乏生物标志物的缺乏表征不良的酶对体内目标参与的确定提出了挑战.
• 可逆抑制剂需要特定的方法来确认生物系统内的标结合.

研究的目的:

• 开发和验证一种基于活性的竞争性蛋白质分析 (ABPP) 方法,以测量可逆抑制剂与酶的结合 in vivo.
• 评估一种针对氨酸化酶LYPLA1和LYPLA2.2的新一类皮佩拉胺抑制剂.
• 为了促进发现小分子探针用于体内酶特征的发现.

主要方法:

• 开发了一种具有竞争力的ABPP战略,使用基于活动的探测器和温和的反应率.
• 在动物模型中应用了竞争性ABPP方法来评估可逆皮佩拉胺抑制剂.
• 利用竞争性ABPP来测量活体中酶活性位点的抑制剂竞争.

主要成果:

• 成功测量了使用竞争性ABPP的可逆抑制剂的体内目标参与.
• 在小鼠中鉴定出具有选择性抑制LYPLA1或LYPLA2的特定皮佩拉胺化合物.
• 在竞争性ABPP中证明了中度反应的探针对体内研究的有用性.

结论:

• 具有适度反应的探针的竞争性ABPP是有效的在体内评估可逆抑制剂的向位参与.
• 这种方法有助于发现小分子探针,用于研究动物模型中的酶功能.
• 开发的策略克服了评估缺乏传统生物标志物的酶抑制剂的挑战.