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Immunofluorescence Microscopy01:12

Immunofluorescence Microscopy

A fluorescence microscope uses fluorescent chromophores called fluorochromes, which can absorb energy from a light source and then emit this energy as visible light. Fluorochromes include naturally fluorescent substances (such as chlorophylls) and fluorescent stains that are added to the specimen to create contrast. Dyes such as Texas red and FITC are examples of fluorochromes. Other examples include the nucleic acid dyes 4’,6’-diamidino-2-phenylindole (DAPI), and acridine orange.
The...

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Peyton Shieh1, Matthew J Hangauer, Carolyn R Bertozzi

  • 1Department of Chemistry, University of California, Berkeley, California 94720, USA.

Journal of the American Chemical Society
|October 3, 2012
PubMed
概括
此摘要是机器生成的。

研究人员开发了用于生物对等成像的新型化酸探针. 这些探针在反应时显示增强的光,使细胞中的蛋白质和糖蛋白可以在不洗的情况下进行选择性标记.

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科学领域:

  • 化学生物学 化学生物学
  • 有机化学 有机化学
  • 生物医学成像技术 生物医学成像技术

背景情况:

  • 生物对等化学反应使生物分子在复杂的生物系统中的特定标记成为可能.
  • 在反应时增加光的化探针是"不洗"成像的理想选择,减少背景噪声.
  • 在生物对等激活后开发具有可预测光增强的探测器仍然是一个挑战.

研究的目的:

  • 理性地设计和合成由生物对等循环添加反应激活的新型化酸探针.
  • 为了识别与基因反应时显著增强光的亚齐多素衍生物.
  • 为了证明这些探头在体外和细胞内无洗条件下标记生物分子的实用性.

主要方法:

  • 密度函数理论 (DFT) 计算,以预测亚酸衍生物的光增强.
  • 在模型反应中合成和实验验证四种亚齐多化衍生物.
  • 在体外对基因功能化的蛋白质进行标记,并在细胞内对糖蛋白进行局部成像.

主要成果:

  • DFT计算指导了有前途的亚齐多化衍生品的识别.
  • 四种合成衍生物在与基因 (Cu催化或无Cu) 反应时显示光增强.
  • 一种4-azidonaphthylfluorescein模拟物证明了蛋白质和糖蛋白的选择性标记,使细胞可在不洗的情况下成像.

结论:

  • 建立了一个平台,以合理设计用于生物直角成像的化酸探针.
  • 在无洗条件下,证明了这些探针在选择性生物分子标记和细胞成像方面的成功应用.
  • 强调了为各种生物成像应用量身定制这些探测器的光谱特性的潜力.