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在正常和放大细胞系中的基因向
1Verna and Marrs McLean Department of Biochemistry, Baylor College of Medicine, Houston, Texas 77030.
Nature
|March 8, 1990
概括
哺乳动物基因向效率不受向DNA度的限制. 研究表明,正常细胞和放大细胞的发病率相似,这表明同质性搜索不是限制发病率的.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 与酵母相比,向DNA重组在哺乳动物细胞中效率较低.
- 这种差异可能是由于哺乳动物基因组中目标DNA序列的度较低.
研究的目的:
- 调查目标DNA度是否会限制哺乳动物细胞中的基因向效率.
- 为了比较中国汉姆斯特卵巢 (CHO) 细胞中的基因向率,具有不同的二叶酸还原酶 (DHFR) 基因拷贝数.
主要方法:
- 利用阳性/阴性选择协议来评估基因向.
- 在正常的CHO细胞 (2个DHFR拷贝) 和放大的CHOC 400细胞 (800个DHFR拷贝) 中比较基因向效率.
主要成果:
- 发现基因向DHFR位点的效率无法区分正常和放大的CHO细胞.
- 目标重组的频率并没有随着目标DNA度的增加而增加.
结论:
- 目标DNA的度不是哺乳动物基因向的速度限制因素.
- 寻找同质性并不是哺乳动物基因向途径的瓶.
- 基因组大小的差异不能解释酵母和哺乳动物细胞之间向结果的差异.