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分子克隆的Bombyx mori prothoracicotropic荷尔蒙的分子克隆
1Department of Biology, School of Science, Nagoya University, Japan.
概括
丝甲虫中的前性生长激素 (PTTH) 被合成为前体,形成与二硫化物结合的二聚体. 这一发现澄清了PTTH对昆虫发育调节的分子基础.
科学领域:
- 昆虫内分泌学 昆虫内分泌学
- 分子生物学分子生物学
- 发展生物学 发展生物学
背景情况:
- 前胸腺增生激素 (PTTH) 是昆虫中脑分泌的关键.
- PTTH通过刺激前胸腺中的ecdysone生产来调节昆虫的发育.
研究的目的:
- 克隆和描述编码丝 (Bombyx mori) PTTH. 的互补DNA.
- 为了阐明PTTH前体的结构和加工.
- 为了确认表达的PTTH的生物活性.
主要方法:
- 补充DNA (cDNA) 克隆和Bombyx mori PTTH的测序.
- 对PTTH前体的推导氨基酸序列分析.
- 在大肠杆菌中 PTTH 的表达.
- 在现场杂交以在昆虫大脑中定位前-前-PTTH mRNA.
主要成果:
- PTTH以224氨基酸前体 (prepro-PTTH) 的形式合成,具有蛋白解裂部位.
- 成熟的PTTH由每次子单元109个氨基酸组成,形成二硫化物结合的同型聚合物.
- 在大肠杆菌中表达的重组PTTH表现出与天然PTTH无法区分的生物活性.
- 预前PTTHmRNA局部存在于Bombyx大脑中的两个特定的神经分泌细胞中.
结论:
- 这项研究定义了Bombyx mori PTTH.的完整氨基酸序列和二维结构.
- 这些发现为PTTH合成,加工和在昆虫发育中的功能提供了分子理解.
- PTTH mRNA的局部化突出了参与其调节的特定神经通路.